【出 处】：

【作 者】：

【摘 要】目的构建和筛选对肝X受体α（LXRα）mRNA和蛋白有抑制作用的LXRα质粒。方法从NCBI网站获得人的LXRαcDNA序列,根据RNA干扰设计原则,设计三条理论上最佳的siRNA序列,相应的双链DNA插入pGenesil-1.1载体中,经酶切和测序鉴定符合设计要求后,用转染试剂PolyJetTM将三条质粒转染至HepG2.2.15细胞中并观察转染效果。然后用RT-PCR和Western印迹方法分析各组LXRα的表达,筛选出干扰效率最佳的质粒。结果三个质粒经测序分析与设计的序列完全一致,酶切凝胶电泳证实质粒构建成功。三个质粒均能抑制LXRαmRNA和蛋白的表达,与shRNA-LXRα2和shRNA-LXRα3质粒比较shRNA-LXRα1质粒表达更低。结论成功构建了LXRαRNAi表达载体,且三条质粒均能高效抑制转染细胞中LXRα的表达,其中第一条质粒shRNA-LXRα1干扰效率最好,从而为脂肪肝的治疗提供了新的方法和材料。