大鼠骨髓间充质干细胞体外向心肌细胞诱导分化的机制
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【摘 要】目的研究大鼠骨髓间宽质干细胞(BMSCs)体外向心肌细胞(CM)定向诱导分化的机制。方法全骨髓贴壁法体外获取大鼠BMSC,流式细胞术榆测CIM4、CIM5和CD105的表达率对其进行鉴定,以未加-抗只加二抗的BMSCs作为平行对照组。选用生长良好、纯度达到95%的P5代BMSCs,用5-氮杂胞苷(5-Aza)10μmol/L进行诱导,对诱导后的细胞进行心肌特异性标志TroponineI的免疫组化检测。在诱导前及诱导2w以RT-PCR方法检测RhoA的表达变化。结果体外分离纯化培养扩增出大鼠BMSCs,表达CD44、和CD105。经10μmol/L5-Aza诱导分化的BMSCs表达心肌特异性标记TroponineI;RT—PCR的结果显示,诱导后的BMSCs表达RhoA。结论BMSCs可体外分离培养扩增,并具有向心肌细胞分化的潜能,5-Aza最佳诱导浓度为10μmol/L。5-Aza体外可能通过RhoA途径在BMSCs分化为心肌细胞过程中起着重要调控作用。