miR-517a-3p对人肺鳞癌细胞生长和转移的影响及分子机制
【出 处】:
【作 者】:
时昌立
秦德华
丁广成
李朋朋
田碧
【摘 要】目的 探讨miR-517a-3p对人肺鳞癌细胞生长和转移的影响及分子机制.方法 肺鳞癌细胞株H460培养24 h后用Lipofectamine 2000转染试剂转染,分为miR-517a-3p过表达组、miR-517a-3p 表达抑制组,并设空白对照组.CCK8检测3组细胞的增殖情况;Transwell检测细胞的侵袭能力;Western印迹检测细胞中侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达水平.构建e2f6-3'Utr区的双荧光素酶报告载体,检测miR-517a-3p对下游靶基因e2f6的调控作用.结果 CCK8检测显示,miR-517a-3p过表达组细胞增殖速度较空白对照组明显降低,miR-517a-3p 表达抑制组增殖率明显提升(P<0.05).miR-517a-3p 过表达组H460穿膜数明显低于空白对照组;miR-517a-3p 表达抑制组穿膜数明显高于空白对照组(P<0.05).miR-517a-3p 过表达组MMP-2和MMP-9蛋白相对表达量均明显低于空白对照组,miR-517a-3p 表达抑制组明显高于空白对照组(P<0.05).过表达miR-517a-3p可明显下调e2f6-3'Utr的报告载体荧光素酶活性,抑制miR-517a-3p表达后可上调荧光素酶活性,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05).过表达miR-517a-3p后e2f6的表达量明显低于空白对照组;抑制miR-517a-3p表达后,e2f6的表达量明显高于空白对照组(P<0.05).结论 miR-517a-3p可通过调控下游靶基因e2f6而抑制肺鳞癌细胞株H460的生长和侵袭力.
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