分化抑制因子1对结肠癌HT-29细胞增殖的影响
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【摘 要】目的检测分化抑制因子1(1d1)对结肠癌HT-29细胞VEGF表达的影响,探讨其在结肠癌增殖中的作用。方法HT-29转染Idl表达质粒,RT-PCR方法和Western印迹法检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蚩白的表达,MTT法榆测各组细胞增殖情况;合成Id-1干扰序列转染HT.29细胞后,RT.PCR及Western印迹榆测HT.29细胞VEGFmRNA和蛋白的表达情况,采用M_rr法检测各组细胞增殖情况。结果1dl表达质粒夺自组、对照组(空载体组)、过表达组VEGF/GAPDHmRNA分别为:0.00299±0.000687、0.00349±0.00134、0.0313±000605(P〈0.01);VEGF/GAPDH蛋白分别为:0.132±0.0351、0.131±0.0530、0.245±0.0326(P〈0.01),MTT实验旺示相对对照组,过表达组增殖明旺快(P〈0.01),Id-1干扰空白组、对照组(窄载体组)、抑表达组VEGF/GAPDHmRNA分别为:0.00616±0.000829、0.00626±0.000447、0.0023±0.000308(P〈0.01);VEGF/GAPDH蛋白分别为:0.450±0.0393、0.464±0.0231、0.231±0.0273(P〈0.01)。MTT实验显示相对对照组.抑表达组增殖明显减慢(P〈0.01).Id1过表达能显著上调VEGFmRNA和蛋白表达,提高细胞的生长,idl抑制后能显著下调VEGFmRNA和蛋白表达,减缓细胞的生长。结论在结肠癌HT-29细胞中Id1为VEGF的上游基因,Id1通过Id1↑—VEGF↑途径来影响结肠癌细胞增殖,在肿瘤血管生成中发挥重要作用。Idl有望成为结肠癌治疗的一个新靶点。
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