Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞增殖与ET-1、VEGF和eNOS蛋白表达的影响
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【摘 要】目的观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAEC)增殖及内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的影响。方法取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAEC并进行原代培养;分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染低氧处理组(低氧组)、Ad+βGal转染再行低氧处理对照组(Ad-13Gal+低氧组)、Ad-Gax转染再行低氧处理组(Ad—Gax+低氧组)。分别在常氧(21%02)和低氧(2.5%O2)6h后,采用OH-胸腺嘧啶核苷(OH-TdR)掺入法和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测PAECs增殖和培养上清液中ET-1、VEGF和eNOS蛋白水平。结果与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组PAEC的^3H-TdR掺入量均显著升高(P〈0.01);与低氧组比较,Ad—Gax+低氧组PAEC的。H—TdR掺入量均明显降低(P〈0.01)。与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组PAEC上清中的VEGF和ET-1水平均显著升高(P〈0.01),而eNOS含量明显降低(P〈0.01);与低氧组比较,Ad-Gax+低氧组PAEC上清中VEGF和ET-1水平均明显降低(P〈0.01),而eNOS水平显著升高(P〈0.01)。结论低氧诱导PAEC异常增殖加速,而此时增强Gax基因表达可抑制细胞异常增殖;低氧上调PAEC中VEGF和ET-1含量,下调eNOS含量,而增强Gax表达可以逆转这种现象。
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